一、概要
是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液、动物饲料相关的产品中。其中B1(AFB1)的毒性、致癌性、污染频率均居于。薄层色谱一直是检测常用的方法,但是此方法制备样品及分析样品时费时又费力。而使用B1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中B1残留。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品,操作时间短,能限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被B1抗原,样本中B1和此抗原竞争抗B1抗体(抗试剂),同时抗B1抗体与酶标二抗(酶标物)相结合,经TMB底物显色,样本吸光值与其含有的B1成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中B1的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测饲料及饲料原料样品中B1的含量。
四、交叉反应率
AFB1 ………………………………………………99%
AFB2 ………………………………………………38%
AFG1 ………………………………………………27%
AFG2 ………………………………………………4%
AFM1 ………………………………………………20%
AFM2 ………………………………………………<1%
五、样本前处理步骤
饲料原料及饲料样本处理方法:
粉碎并称取样品置入100mL具塞三角瓶中,加入甲醇混合;于振荡器上剧烈振荡;取液体离心;取上清或滤液,再加入去离子水(稀释后的液体PH值应保证在6~8之间,可用1M“NaOH”或“HCl”进行调节)振荡,取液分析。
样品稀释倍数:1倍
六、操作步骤
1 、将所需试剂回温;
2 、取出需要数量的微孔板;
3 、洗涤工作液回温;
4 、编号;
5 、加标准品/样本;
6 、洗板;
7 、显色;
8 、测定。
七、结果判定
1 、粗略判定
2 、定量分析
八、检测方法检测限、回收率、精密度
检测限:
饲料原料及饲料成品………………………………2.5µg/kg
回收率:
饲料原料及饲料成品………………………………90±15%
精密度:
试剂盒的变异系数均小于10%
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期:该产品有效期为12个月。